RAF信号通路

目的 分析着丝粒蛋白N(CENP-N)在卵巢癌组织和正常卵巢组织中的表达及与卵巢癌患者临床特征的相关性。方法 选取2019年6月—2020年5月辽宁省健康产业集团抚矿总医院收治的卵巢癌患者60例和良性妇科疾病患者60例为研究对象，对病理科保存的卵巢癌组织和因良性妇科疾病手术切除的正确认细节常卵巢组织进行研究，采用免疫组织化学染色法测定卵巢癌组织、正常卵巢组织中CENP-N表达情况。分析CENP-N在卵巢癌组织、正常卵巢组织中阳性表达情VX-661分子式况、与卵巢癌患者临床特征的相关性及对卵巢癌的预测价值。结果 CENP-N在卵巢癌组织中阳性表达率为85.00%(51/60),在正常卵巢组织中阳性表达率为18.33%(11/60),与正常卵巢组织比较，CENP-N在卵巢癌组织中的阳性表达率升高，差异有统计学意义(χ~2=53.393,P<0.05)。CENP-N表达与卵巢癌hepatitis A vaccine患者年龄、病理类型及肿瘤直径无关，差异均无统计学意义(均P>0.05);CENP-N表达与卵巢癌患者FIGO分期、分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移相关，与Ⅰ～Ⅱ期、高分化、无浸润、T1+T2浸润及无淋巴结转移的患者比较，Ⅲ～Ⅳ期、中低分化、T3+T4浸润、有淋巴结转移的患者CENP-N阳性表达率升高，差异均有统计学意义(均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示，CENP-N预测卵巢癌的曲线下面积(AUC)为0.860(95%CI:0.726～0.994),灵敏度为85.12%,特异度为77.65%。结论 CENP-N在卵巢癌组织中表达升高，且与患者FIGO分期、分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移等临床特征相关，可用于卵巢癌的临床预测。

目的 探索脾虚状态下外泌体促肝癌转移的机制。方法 使用随机数字表法将C57BL/6小鼠随机分为4组：正常对照组、脾虚组NSC 119875纯度、肝癌组、脾虚肝癌组，每组10只，正常对照组腹腔注射生理盐水，脾虚组腹腔注射利血平，肝癌组采用肝癌原位移植术，脾虚肝癌组采用腹腔注射利血平加肝癌原位移植术。利血平腹腔注射共持续21天，确定脾虚模型建立后再行肝癌原位移植术，术后14天取材。基于模型血浆提取小鼠外泌体并使用电镜、颗粒分析及纳米流式鉴定。以外泌体为变量使用划痕实验、Transwell迁移与侵袭实验、尾静脉肺转移裸鼠模型验证脾虚状态下外泌体促肝癌转移的表型。随后对肝癌组和脾虚肝癌组外泌体进行miRNA测序鉴定差异miRNAs，并分析miRNAs靶向的mRNAs的通路富集结果。结果 与肝癌组比较，脾虚肝癌组小鼠的脾虚积分更高（P<0.0001）及肿瘤体积更大。电镜、颗粒分析及纳米流式结果成功鉴定外泌体。划痕实验、Transwell迁移及侵袭实验结果表明脾虚肝癌组外泌体在体外促进了肝癌细胞的转移能力（P<0.medical informatics0001）。尾静脉肺转移裸鼠模型的活体成像结果表明脾虚肝癌组外泌体在体内促进了肝癌细胞的转移能力。外泌体miRNA测序结果表明15个miRNAs在脾虚肝癌组差MC3异表达，其中9个上调（miR-183-3p,miR-1247-5p,miR-543-3p,miR-495-3p,miR-466i-5p,miR-540-5p,miR-125b-5p,miR-214-3p,miR-499-5p）,6个下调（miR-6516-5p,miR-450a-3p,let-7g-3p,miR-103-5p,miR-5129-3p,miR-301b-3p）。差异表达miRNAs靶向的mRNAs富集的通路与转移相关（Wnt signaling pathway）。结论 脾虚内环境来源的状态下外泌体通过miRNA-mRNA轴促进肝癌转移。

心力衰竭是多种病因导致的心脏疾病最终阶段，具有Expanded program of immunization较高的患病率、死亡率、伤残率，成为医疗领域的一大难题。心肌细胞是构成心脏的最基本单位，其特点具有不可逆性，发生心力衰竭时会导致心肌细胞出现各种各样的损伤或坏死。心肌细胞损伤也是导致患者心脏功能障碍、影响其预后与生存质量的关键原因。因此，减轻心肌细胞损伤程度，延缓其细胞死亡进程有利于降低心力衰竭患者的心功能损伤水平，改善其预后效果，Colforsin体内进而降低病死、病残率和住院次数。铁死亡是近年来被广泛关注的新型细胞死亡形式，已有研究证实心肌细胞存在铁死亡现象。作为一种可调节的细胞死亡形式，干预铁死亡可以实现对心肌细胞损伤程度与死亡进程的调节。研究表明抑制铁死亡可以起到对心肌细胞保护性作用，进而治疗心力衰竭。中医药已被广泛应用于心力衰竭的临床诊疗中，具有多途径、多切入点的优势，治疗效果显著PLX5622化学结构、安全且副作用低、医疗费用少，还降低西药的临床副作用，并取得了较好的临床效果。以中医药调节铁死亡作为切入点可能是未来治疗心力衰竭的新方向。本文简要阐述铁死亡机制，研究铁死亡在心力衰竭中的作用，探讨中医药干预心力衰竭中的铁死亡研究现状，为进一步提升中医治疗心力衰竭的疗效提供参考。

探讨黄芩汤（HQT）对硫酸葡聚糖钠盐（dextran sulfate，DSS）诱导的溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis，UC)模型小鼠NLRP3/Caspase-1信号通路的影响。将C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组（DSS组）、黄芩汤低（HQT-L组）、中（HQT-M组）、高（HQT-H组）剂量组、西药美www.selleck.cn/products/azd6738沙拉嗪组（西药组），建立小鼠UC模型。造模成功后，HQT-L组、HQT-M组、HQT-H组和西药组分别给予低、中、高剂量的黄芩汤和美沙拉嗪混悬液灌胃，空白组和DSS组分别给予等容积的蒸馏水灌胃，给药10 d后，测定各组小鼠体质量、疾病活动指数（DAI）评分、结肠组织病理学评分，采用ELISA法测定血清白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）、白细胞介素10（interleukin-10，IL-10）、白细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）含量，实时荧光定量（quantitative real-time，Q-PCR）法测定结肠组织NLRP3、Caspase-1 mRNA的表达，免疫组化法检测结肠组织NLRP3、Caspase-1蛋白表达情况。结果显示，与空白组相比，DSS组小鼠体质量明显下降，DAI评分、肠道组织病理学评分明显增高。与DSS组相比，medical assistance in dyingHQT各组及西药组的DAI评分明显改善，其中以HQT-M组、HQT-H组及西药组改善较为明显（P＜0.05）；HQT各组及西药组的肠道组织病理学评分明显下降，其中以HQT-M组、HQT-H组及西药组改善较为显著（P＜0.05）。此外，与空白组相比，DSS组结肠组织中NLRP3、Caspase-1表达明显增多，同时小鼠血清中IL-6、IL-1β、TNF-α含量明显增高，IL-10含量明显降低。与DSS组小鼠相比较，HQT各组与西药组结肠组织中NLRP3、Caspase-1表达明显降低；而HQT各组和西药组的血清IL-6、IL-1β、TNF-α含量明显降低，IL-10含量显著升高，且HQT-H组及西药组改善最为明显（P＜0.01）。综上，黄芩汤可能通过调节NLRP3/Caspase-1经典细胞焦亡途径降低结肠组织中NLRP3selleckchem、Caspase-1的表达，减少血清中IL-6、IL-1β、TNF-α的表达，增加IL-10的表达，从而改善DSS小鼠的肠道损伤症状及肠黏膜的炎症浸润，发挥其治疗作用。

目的 评估全国三级医院专家和社区专家对高血压指南认知和执行的差异。方法 采取抽样法选择全国三级医院高血压专业44名专家(三级医院专家组),北京市海淀区社区卫生服务中心全科医学专家29名(社区专家组)。参照2018年中国高血压防治指南和2019年高血压基层诊疗指南初步建立评估问卷，对问卷中血压监测、危险因素、靶器官损害三部分内容进行评分。比较三级医院专家与社区专家对高血压指南认识的重要性和可行性的差异。结果 三级医院专家组通过手机APP督促家庭自测血压和初诊动态血压比例的可行genetic information性评估明显低于社区专家组(75.0%vs 93.1%,P=0.048;81.8%vs 100.0%,P=0.040)。三级医院专家组初诊、叶酸干预后复查和每年复查同型半胱氨酸的重要性评估明显低于社区专家组，每年复查同型半胱氨酸比例PS-341 MW的可行性评估明显低于社区专家组selleck NMR，差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。三级医院专家组初诊颈动脉超声、混合斑或软斑治疗后复查、初诊超声心动图、左心室肥厚每年复查及心肌梗死和心力衰竭根据需要调整检查比例的可行性评估明显低于社区专家组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 三级医院专家和社区专家对高血压指南认知和执行在某些指标上存在不同，希望通过培训和临床实践缩小差异，进一步提升血压管理水平。

海带、坛紫菜和裙带菜是我国大型经济海藻，具有丰富的营养价值和保健功能。该论文对比研究了海带、坛紫菜和裙带菜中游离和结合酚提取物的总酚含量、总黄酮含量、抗氧化能力，以及α-葡萄糖selleck NMR苷酶、酪氨酸酶和乙酰胆碱酯酶的抑制能力，旨在为3种海藻的高附加值开发提供指导。结果表明，3种海藻原料中均以结合酚为主，坛紫菜结合酚提取物具有最高的总酚含量（863.53 μg GAE/g DW），其次为裙带菜结合酚提取物（819.67 μg GAE/g DW）；裙带菜游离酚提取物中的总黄酮含量最高（49.31 μg QuE/g DW）。海带结合酚提取物具有最强的DPPH自由基清除和酪寻找更多氨酸酶活性抑制能力，裙带菜结合酚提取物的α-葡萄糖苷酶malaria vaccine immunity和乙酰胆碱酯酶抑制能力最强，而坛紫菜游离酚提取物的ABTS阳离子自由基清除能力最强，IC_(50)值分别为401.19、196.28、156.52、289.46、213.21 μg/mL，海带和裙带菜结合酚提取物的铁离子还原能力较好，且无显著差异（P > 0.05）。相关性分析表明，酚类化合物是3种海藻提取物中主要的抗氧化和酶活性抑制成分。因此，相比于其他两种海藻，海带作为抗氧化剂和酪氨酸酶抑制剂的开发潜力更大，裙带菜可作为α-葡萄糖苷酶和乙酰胆碱酯酶抑制剂的潜在资源。

目的：探究妊娠https://www.selleck.cn/products/kpt-330.html期糖尿病(GDM)患者糖化血红蛋白(HbA1c)、脂联素(ADP)水平及对不良妊娠结局的影响。方法：收集2018年6月-2020年6月于本院妇产科产前检查并分娩的产妇临床资料，其中GD获悉更多M孕妇108例为GDM组、健康孕妇98例为对照组，比较两组HbA1c、ADP水平和妊娠结局，logistic回归模型分析HbA1c、ADP水平对不良妊娠结局的影响。结果：GDM组血糖、空腹胰岛素和HbA1(7.64±1.25)%水平均高于对照组(5.14±0.81)%,ADP(7.85±0.94 ng/L)水平低于对照组(12.16±1.47 ng/L),胎膜早破(18.5%)、羊水过多(20.4%)和羊水粪染(13.9%)发生率高于对照组(8.2%、6.1%、3.1%),新生儿早产(14.8%)、巨大儿(23.2%)和胎儿窘迫(10.2%)发生率高于对照组(5.1%、5.1%、2.0%)(均Histology EquipmentP<0.05)。GDM患者中，HbA1≥6.0%、ADP<10mg/L孕妇不良妊娠结局、新生儿不良结局发生率均高于HbA1<6.0%和ADP≥10mg/L孕妇(P<0.05)。回归分析显示，HbA1≥6.0%、ADP<10mg/L是GDM孕妇发生不良妊娠结局的影响因素(P<0.05)。结论：HbA1c、ADP水平异常的GDM患者不良妊娠结局发生风险增加，提示临床应密切关注GDM患者该两项指标水平，指导临床干预措施，降低不良妊娠发生。

目的 报道桡骨远端骨肉瘤患者肿瘤学和功能学中长期随访结果。方法 回顾分析2000年1月至2019年12月，我院收治桡骨高级别骨肉瘤25例，其中桡骨远端20例，桡骨干5例。收集患者性别、年龄、病理学诊断、外科边界、重建方式、是否复发转移和功能评分作为研究参数，分析桡骨远端骨肉瘤手术治疗的肿瘤学结果、预后因素和功能评价。结果 纳入研究的20例中，男15例，女5例，年龄8～51岁，平均20岁(中位年龄17岁)。所有病例均为我院初治，囊内切除1例，边缘切除2例，广泛切除16例，根治性切除1例。初次手术保肢14例，点击此处6例切除后自体大段腓骨移植重建，4例尺骨中置腕关节融合固定，2例大块自体髂骨移植腕关节融合固定，1例同侧尺骨截骨移植重建，1例骨水泥间隔物重建，截肢6例。随访期内局部复发2例行截肢，最终保肢12例，截肢8例。8例重建术后保留前臂旋转功能，4例丧失旋转功能。20例随访6～228个月，平均66.5个月，中位时间49.5个月。复发2例(10%)，远隔转移6例(30%)，术后并发症4例(20%)，因并发症再次手术3例，随访期末死亡6例。5年生存率67.5%,10年生存率57.9%,5年无复发生存率65.5%。3-MA molecular weight多因素分析表明转移是死亡的独立危险因素。MSTS功能评分可评价的12例，upper extremity infections平均为(26.9±2.0)分，最终12例保肢，占60%。保肢成功后功能满意。结论 桡骨远端骨肉瘤罕见、外科边界不足是局部复发危险因素；远处转移是死亡的独立预后因素。本组病例保肢治疗肿瘤学控制良好，最终功能评价满意。

目的 探讨长链非编码RNA(Lnc RNA)X染色体失活特异转录物（Lnc RNA XIST）在T2DM患者外Entinostat使用方法周血单个Airway Immunology核细胞（PBMC）中的表达及与胰岛β细胞功能的关系。方法 收集新疆哈萨克族健康人群与T2DM患者外周静脉血行高通量测序筛选出差异性表达的Lnc RNA，选取新疆哈萨克族T2DM患者（T2DM组，n=30）及体检健康人群（NC组，n=30），测量身高、体重、WC、臀围、SBP、DBP，检测FPG、Hb A1c、FIns、TG、TC、HDL-C、LDL-C、血尿酸、BUN、血肌酐，计算BMI、WHR、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、胰岛β细胞功能指数及胰岛素敏感指数；采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术检测受试者PBMC中Lnc RNA XIST表达水平。结果 q RT-PCR检测结果显示，Lnc RNA XIST在T2DM组PBMC中的表达水平是NC组的3.75倍（P<0.05）。Pearson相关分析显示，新疆哈萨克族T2DM患者Lnc XIST基因表达水平与HOMA-IR呈正相关（P<0.05），与FIns呈负相关（P<0.01）。受试者工作特征（ROC）曲线显示，Lnc XIST的ROC曲线下面积为0.692(95%CI0.558～0.826,P<0.05)。结论 新疆哈萨克族T2DM患者Lnc XIST基因表达水平与胰岛β细胞功能和IR有关；PBMC中Lnc CB-839RNA XIST表达升高可能参与新疆哈萨克族T2DM。

研究背景糖尿病心肌病(Diabeticcardiomyopathy,DCM)是糖尿病最常见的并发症之一,通常表现为无高血压或冠心病的糖尿病患者特有的心肌结构和功能异常。由于DCM发病机制复杂,且缺乏有效治疗方法,故一直是近年来的研究热点。(前)肾素受体[(Pro)renin receptor,PRR]是肾素的特异性受体,作为肾素血管紧张素系统(Renin-angiotensin system,RAS)的重要组分,有研究表明其是糖尿病发病及其导致终末器官损害的关键因素。焦亡,作为一种伴随炎症级联反应的新型细胞死亡方式。有研究表明,核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白 3(Nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)介导的细胞焦亡参与DCM的病理过程。此外,还发现通过激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)可抑制 NLRP3 介导的 DCM 心肌焦亡。但目前尚不明确PRR是否通过AMPK-NLRP3途径参与DCM心肌焦亡,故探讨PRR对DCM心肌细胞焦亡的影响及其机制,可能为治疗DCM提供新的靶点和思路。研究目的1.构建DCM大鼠模型,观察DCM心肌组织中PRR、AMPK、NLRP3等焦亡相关蛋白表达情况;2.构建 PRR 过表达腺病毒(PRR overexpression adenovirus,Ad-PRR),观察 PRR 过表达对DCM心肌组织中AMPK、NLRP3等焦亡相关蛋白表达水平、纤维化水平及心功能的影响;3.用高糖刺激心肌细胞,观察PRR、AMPK、NLRP3等焦亡相关蛋白表达水平;应用Ad-PRR及AMPK激动www.selleck.cn/products/pf-03084014-pf-3084014剂(GSK621)干预心肌细胞,观察PRR过表达对高糖刺激下心肌细胞焦亡的影响及调控机制。研究方法1.构建PRR过表达腺病毒:根据大鼠的PRR基因序列(Gene ID:302526),委托上海吉玛公司构建腺病毒包被的PRR基因过表达载体(PRR overexpression adenovirus,Ad-PRR),同时构建空病毒载体(Empty vector adenovirus,Ad-EGFP)作为病毒对照。2.构建DCM模型:选取60只8周龄的Wistar大鼠,适应性喂养一周后,随机分为2组:对照组(n=15)、糖尿病组(n=45),其中,糖尿病组大鼠在空腹12h后腹腔大剂量注射链脲佐菌素(STZ,65mg/kg)。注射1周后,3次随机血糖均大于11.1mmol/L,并伴有多饮多尿多食等症状的大鼠视为糖尿病造模成功。在糖尿病造模成功12周后,对各组大鼠行超声心动图检查心功能,当心腔扩大、收缩功能减弱则视为DCM造模成功。随后,DCM大鼠随机分为3组,每组15只,具体为DCM组、DCM+PRR过表达腺病毒组(Ad-PRR组)、DCM+空载体腺病毒对照组(Ad-EGFP组),并分别经尾静脉注射100μL无菌PBS缓冲液、Ad-PRR(1 × 109PFU,溶于100μL无菌PBS缓冲液)、Ad-EGFP(1 × 109PFU,溶于100μL无菌PBS缓冲液)。在给予腺病毒注射处理2周后,从每组随机取3只大鼠检测病毒转染效率。在给予腺病毒注射处理4周后,将所有大鼠给予麻醉处理,行超声检测心功能后取材以备后续实验。3.心功能检测:将各组大鼠采用腹腔注射水合氯醛的方式(0.3mL/100g)进行麻醉后,用VEVO770成像系统检测各组大鼠的左室射血分数(LVEF)、左室收缩末期直径(LVESD)、左室舒张末期直径(LVEDD)及E/A比值等心功能指标。4.在实验期间定期测量大鼠的体重、心重、血糖、血压等数据。5.用HE染色观察心肌组织结构变化。6.用免疫组织化学染色观察心肌组织中NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Caspase-1)、白介素1 beta(IL-1β)、白介素18(IL-18)等焦亡相关蛋白的表达以及Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Collagen-Ⅲ)等纤维化蛋白的表达。7.用Masson染色试剂盒检测心肌组织中胶原纤维表达水平。8.提取原代心肌细胞:取0～3日龄Wistar大鼠心脏,冲洗、剪碎并用胶原酶Ⅱ消化后,取上清并离心,将沉淀用心肌细胞培养液悬浮。根据心肌细胞和成纤维细胞贴壁速度不同,将心肌细胞和成纤维细胞分离。将得到的心肌细胞接种到六孔培养板中进行后续实验。9.原代心肌细胞干预:首先,分为正常组(normal group,N组)、高渗组(hypertonic group,HVP-16分子量P 组)、高糖组(high glucose,HG 组),观察高糖刺激对 PRR 及 NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18的影响;其次,分为正常组(N组)、高糖组(HG组)、高糖+PRR过表达腺病毒组(Ad-PRR组)、高糖+空载体腺病毒对照组(Ad-EGFP组)。Ad-PRR组及Ad-EGFP组分别转染Ad-PRR、Ad-EGFP,并与高糖组一起给予高糖刺激,再观察PRR过表达对上述蛋白的影响;最后,分为高糖+PRR过表达腺病毒组(Ad-PRR组)、高糖+PRR过表达腺病毒+AMPK激动剂GSK621组(Ad-PRR+GSK621组)、高糖+空载体腺病毒对照组(Ad-EGFP组)、高糖+空载体腺病毒对照+AMPK激动剂GSK621组(Ad-EGFP+GSK621组),各组分别转染Ad-PRR及Ad-EGFP后,给予高糖刺激及GSK621进行干预,观察PRR是否通过AMPK-NLRP3途径调控心肌细胞焦亡。10.采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测心肌组织及心肌细胞中PRR、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18 等的 mRNA水平。11.采用免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织及心肌细胞中PRR、t-AMPK、p-AMPK、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18 等分子的蛋白表达水平。12.应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测大鼠血清中及心肌细胞培养基中IL-1β、IL-18的含量。13.应用二氢乙啶(DHE)染色检测心肌细胞中活性氧(ROS)的水平。14.统计学分析:将数据用GraphPad 8.0软件进行处理,各组实验数据用平均数±标准差表示,并通过单因素方差分析的方法对多组数据进行相互比较。以P<0.05为差异有统计学意义。研究结果1.在DCM心肌组织中PRR表达增加,NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18等焦亡蛋白分子表达增加,AMPK磷酸化水平降低,纤维化水平增加。过表达PRR后,上述焦亡相关蛋白表达明显增加,AMPK磷酸化水平明显下降,纤维化水平明显升高,从而加重DCM的心功能损伤。2.在高糖刺激下,原代心肌细胞中PRR表达增加,NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18等焦亡相关蛋白表达增加,AMPK磷酸化水平降低。过表达PRR后,ROS水平明显增加,AMPK磷酸化水平明显Dynamic biosensor designs下降,上述焦亡相关蛋白表达明显增加,焦亡水平增加。3.在高糖刺激下,在PRR过表达基础上给予AMPK激动剂干预后,发现AMPK磷酸化水平升高,NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18等焦亡相关蛋白表达降低,焦亡水平降低,可逆转过表达PRR引起的焦亡水平增加。结论及意义在DCM中,高血糖刺激PRR表达升高,AMPK磷酸化降低,DCM心肌发生NLRP3介导的焦亡。过表达PRR可明显降低AMPK磷酸化,增加DCM心肌焦亡水平,增加纤维化水平,从而加重DCM心功能损伤。这表明PRR参与DCM心肌焦亡,并可能与DCM心肌中AMPK磷酸化水平降低、ROS水平升高、NLRP3过度激活有关。这可能为DCM的治疗提供新思路和靶点。