RAF信号通路

本研究的目的是为了探讨紫九牛总蒽醌对SGC7901Liproxstatin-1供应商人胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭作用的影响及其与PI3K/AKT/mTOR通路的相关性protamine nanomedicine。用紫九牛总蒽醌（15.625、31.25、62.5、125、250、500 μg/mL）处理细胞不同时间后，CCK-8法检测细胞增殖能力；Hoechst细胞染色与Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡情况；划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移与侵袭能力；Western blot检测线粒体途径凋亡蛋白Cleaved-Caspase3、BAX、BCL-2，迁移与侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9以及PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白AY-22989生产商表达。结果显示，与对照组比较，紫九牛总蒽醌对SGC7901细胞增殖有显著抑制作用（P<0.01），抑制率与药物浓度、作用时间呈正相关，48 h与72 h的IC_(50)分别为190 μg/mL、120μg/mL。紫九牛总蒽醌100 μg/mL、50 μg/mL浓度能诱导SGC7901细胞凋亡（P<0.05）。紫九牛总蒽醌100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL浓度能抑制SGC7901细胞迁移能（P<0.01或P<0.05）。紫九牛总蒽醌100 μg/mL、50 μg/mL浓度能抑制SGC7901细胞侵袭能力（P<0.01或P<0.05）。紫九牛总蒽醌100 μg/mL能下调MMP-2、MMP-9蛋白表达水平（P<0.05），紫九牛总蒽醌100 μg/mL、50 μg/mL均能上调Cleaved-Caspase3、BAX及下调p-AKT蛋白表达水平（P<0.01或P<0.05），紫九牛总蒽醌100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL均能下调p-mTOR、BCL-2蛋白表达水平（P<0.01或P<0.05）。本研究发现紫九牛总蒽醌能抑制SGC7901细胞增殖，诱导凋亡，抑制迁移与侵袭能力，其作用机制与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

目的 探究前列地尔联合胰激肽原酶对糖尿病肾病患者糖脂代谢、肾功能及炎症因子水平的影响。方法 按照随机数字表法将2020年1月至2021年2月灵璧县人民医院收治的94例糖尿病肾病患者分为对照组和观察组，各BIBW299247例。两组患者均进行适当运动、保证睡点击此处眠、饮食疗法及控制血糖、血压、血脂等常规对症治疗，对照组患者在常规治疗的基础上使用胰激肽原酶治疗，观察组患者在对照组的基础上使用前列地尔治疗，两组患者均治疗2周。比较两组患者治疗后临床疗效，治疗前后糖脂代谢指标、肾功能指标及炎症因子水平。结果 观察组患者的治疗总有效率高于对照组；治疗后两组患者血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、空腹血糖（FPG）、内脂素（Visfatin）、尿素氮（BUN）、β_2-微球蛋白（β_2-MG），超敏-C反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均低于治疗biorelevant dissolution前，且观察组低于对照组（均P<0.05）。结论 在胰激肽原酶治疗的基础上，给予糖尿病肾病患者前列地尔治疗，可改善患者机体糖脂代谢，改善肾功能，减轻机体炎症反应，疗效显著。

目的比较某三级乙等综合性医院2008年度和2015年度每位输注红细胞类血液患者的累计用血量、年龄构成、病种构成及按年龄和病种分组的用血总人数、用血总量等指标,分析导致近年来临床用血量增长的主要人群和病种。方法统计2008年和2015年度每位输血患者红细胞类血液的累计用血量,再按年龄分组、疾病peanut oral immunotherapy分类,分别统计各组别的用血总人数、用血总量,并计算各组用血人数和用血量的7年累计增长率。结果用血人数增长率最高的依次是儿童少年组、老年组、新生儿组,分别增长了141.2%、10Bafilomycin A1临床试验6.3%、88.0%;用血量增长率最高的是老年组、儿童少年组、中CP-456773生产商年组,依次增长了100.9%、80.8%、45.1%;普通内科疾病、恶性血液病、消化道出血、恶性肿瘤、普通外科、产科、意外伤害患者的用血人数依次增长了113.0%、104.3%、64.9%、62.8%、35.1%、31.2%、27.8%,用血量分别增长了92.6%、226.5%、95.1%、48.1%、28.0%、12.2%、5.1%;妇科的用血人次和用血量无明显变化。结论中、老年人是临床用血的主要群体,恶性肿瘤、消化道出血、恶性血液病等患者的增多及开展心脏外科手术是该院临床用血量增长的主要原因,同时与人口老龄化、国家实行”二胎”政策有关。

目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)UNC5B-AS1对宫颈癌细胞增殖及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法 利用GEO和TCGA数据库进行差异表达分析,采用qRT-PCR在正常与癌变宫颈组织中进行验证,筛选出差异表达lncRNA UNC5B-AS1。在宫颈癌细胞株中转染lncRNA UNC5B-AS1干扰和过表达质粒,通过平板克隆、CCK-8、EdU实验检测lncRNA UNC5B-AS1对宫颈癌细胞增殖的影响;通过Transwell实验检测其对宫颈癌细胞迁移、侵袭能力的影响;通过Western blot检测EMT相关蛋白E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin的表达水平;通过转录组测序得到lncRNA UNC5B-AS1调控的信号通路,验证其相关基因的表达水平EPZ-6438说明书。结果 RNA微阵列和生物信息学分析显示,lncRNA faecal microbiome transplantationUNC5B-AS1在宫颈癌中的表达水平明显高于正常宫颈组织,并与患者的总生存时间相关。与阴性对照组相比,敲低lncRNA UNC5B-AS1可降低宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭,而过表达则促进宫颈癌细胞增殖、Protein Tyrosine Kinase抑制剂迁移及侵袭。Western blot显示,lncRNA UNC5B-AS1能调控宫颈癌细胞EMT。转录组测序表明lncRNA UNC5B-AS1能调控Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)信号通路。qRT-PCR及Western blot结果提示,敲低及过表达lncRNA UNC5B-AS1组中TLR相关基因IL6、TICAM2表达水平明显改变(P<0.05)。结论 LncRNA UNC5B-AS1在宫颈癌中高表达,高表达lncRNA UNC5B-AS1可通过增强TLR信号通路活性,促进宫颈癌细胞增殖及EMT能力。

目的 探讨糖尿病肾病患者负性情绪的影响因素及心理行为BMS-354825 molecular weight干预的效果。方法 将231例糖尿病肾病患者根据焦虑自评量表及抑郁自评量表评分分为负性情绪组121例与非负面情绪组110例，分析糖尿病肾病患者负性情绪的影响因素，将负性情绪组患者按照随机数字表法分为median filter研究组61例与对照组60例，均给予药物治疗，selleck NMR研究组联合心理行为干预。干预前后比较研究组与对照组焦虑自评量表及抑郁自评量表评分，比较空腹血糖、糖化血红蛋白、尿素氮、血肌酐水平。结果 干预后研究组与对照组空腹血糖、糖化血红蛋白、尿素氮及血肌酐水平均较干预前显著降低(P<0.01),研究组显著低于对照组(P<0.01)。干预后研究组与对照组焦虑自评量表及抑郁自评量表评分均较干预前显著降低(P<0.01),研究组显著低于对照组(P<0.01)。结论 家庭人均月收入<3 000元、糖尿病肾病病程≥7 a、疾病分级≥Ⅲ级及透析治疗是糖尿病肾病患者负性情绪的影响因素，心理行为干预能显著缓解糖尿病肾病患者的负性情绪，促进血糖和肾功能指标改善。

弹性蛋白酶抑制剂能够抑制生物体内弹性蛋白酶的活性,治疗因弹性蛋白酶过度表达引起的胰腺炎、囊肿、病毒感染、肺气肿、肿瘤、炎症及损伤等。运用酶靶筛选模型,分子对接技术以及多光谱法对几种弹性蛋白酶抑制剂:人工合成并已临床应用的药物-西维来司钠,从天然植物提取的活性成分-去甲络石苷、络石苷以及从人体中提取的活性成分-乌司他丁展开抑制活性评价,并对几种抑制剂与弹性蛋白酶的相互作用进行研究,研究内容如下:通过建立酶靶活性筛选模型、运用酶反应动力学研究抑制剂的抑制作用,根据Lineweaver-Burk双倒数法,判断出人工合成并已临床应用的弹性蛋白酶抑制剂西维来司钠(ONO-5046)对弹性蛋白酶存在竞争性抑制作用,IC_(50)=9.98μmol/L,K_i=13.50×10~(-6)mol/L。以上结果表明,西维来司钠对弹性蛋白酶有较强的抑制作用。运用多光谱法及分子对接模型研究西维来司钠与弹性蛋白酶的相互作用机制,结果表明,西维来司钠与弹性蛋白酶的结合能力较强,可形成1:1的复合物,ΔH<0和ΔS<0表明氢键与范德华力为其主要结合作用力;西维来司钠的加入改变了弹性蛋白酶的二级构象,使氨基酸残基周围环境的极性增加、亲水性增加、疏水性降低,弹性蛋白酶的无规则卷曲比例升高,α-螺旋、β-折叠比例有所降低。分子对接结果表明西维来司钠与弹性蛋白酶之间存在氢键、范德华力、静电作用及盐桥作用等多种作用力,当分子骨架中有能与弹性蛋白酶氨基酸残基形成氢键的多个酰基基团、苯环,较长的共轭结构、疏水基团以及能与ARG形成盐桥作用的羧基负离子的存在,都有利于其与弹性蛋白酶的结合,形成稳定的复合物。络石藤木脂素活性单体能够在一定程度上抑制弹性蛋白酶的活性。以络石藤木脂素活性成分为研究对象,通过体外靶酶筛选模型和酶反应动力学,测定出络石苷对弹性蛋白酶作用的抑制常数K_i值及抑制类型,络石苷对弹性蛋白酶的抑制作用属于竞争性抑制,抑制常数K_(i(络石苷))=2.40×10~(-3)mol/L。同时,相同浓度的去甲络石苷抑制活力比络石苷弱。结合前期的工作基础,络石藤六种二苄基丁内酯类木脂素对弹性蛋白酶的抑制能力,从大到小依次为:牛蒡苷元、络石苷元、罗汉松树脂酚、去甲络石苷元、络石苷、去甲络石苷。为了明确二苄基丁内酯类活性成分对弹性蛋白酶的抑制作用及构效关MDV3100说明书系,采用分子对接技术,模拟活性单体与弹性蛋白酶的相互作用,进一步表明:苯环上酚羟基的O-甲基化对弹性蛋白酶抑制剂的抑制活性是有利的,苯环上4位酚羟基的O-糖基化,五元环8’位上连接羟基对弹性蛋白酶的抑制活性是不利的。乌司他丁(UTI)是一种从成年男性尿液中分离提取的蛋白酶抑制剂,能够对弹性蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶等多种水解酶的活性产生抑制作用。运用酶靶活性筛选模型测定出乌司他丁对弹性蛋白酶的抑制作用较强,IC_(50)=22.50Biocarbon materialsμmol/L,K_i=19.80×10~(-6)mol/L,酶反应动力学研究表明其抑制类型为竞争性抑制。通过分析荧光光谱结果可知:乌司他丁与弹性蛋白酶的猝灭类型为静态猝灭,其主要结合作用力为氢键与范德华力。同步荧光光谱法、紫外-可见吸收光谱法、圆二色谱法及红外光谱法结果表明,乌司他丁改变BI 10773体外了弹性蛋白酶中氨基酸残基的微环境并对其二级结构产生了影响。通过比较三类弹性蛋白酶抑制剂的K_i值及IC_(50)值可知:西维来司钠的抑制能力最强,乌司他丁次之,络石藤木脂素活性单体最弱。从结构上分析:西维来司钠分子骨架中包含磺酰基、酰胺基、酯基、羧基以及2个苯环,多个酰基基团处在较长的共轭结构中,能够与弹性蛋白酶的氨基酸残基形成氢键,端碳上有3个甲基,分子间存在疏水作用,羰基中的氧负离子与弹性蛋白酶中带电荷的ARG存在盐桥作用。两者之间存在多种作用力,结合能力更强,抑制活性最好。而与西维来司钠相比,络石藤二苄基丁内酯类木脂素虽然具有苯环、酚羟基、甲氧基和环内酯等结构,但其共轭结构短,作用位点的个数少,作用力弱,所以抑制活性相对弱。以上结论为新型弹性蛋白酶抑制剂的设计、合成、修饰和改造提供参考。

目的 分析GDM患者外周血hs-CRP、SAA、RBP4水平与产后代谢综合征的关系。方法 选取2018年1月至2020年1月中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院诊治的82例GDM患者（观察组）与53例健康孕妇（对照组）的临床资料进行回顾性分析，观察组根据产后1年内有无发生代谢综合征（MS）分为MS组（n=41）与非MS组（n=41），对比hs-CRP、SAA、RBP4水平，以及采用Logiimmune genestic分析hsCL 318952细胞培养-CRP、SAA、RBP4表达量对产后代谢综合征的影响。结果 观察组和MS组的hs-CRP、SAA、RBP4、BMI、FPG、SBP、TG表达量分别高于对照组与非MS组（P <0.05）。Pearson相关性分析显示，hsCRP与BMI、FPG、SBP、TG呈正相关（P <0.05）;SAA与BMI、FPG、SBP、TG呈正相关（P <0.05）;RBP4与BMI、FPG、SBP、TG呈正相关（P <0.05）。Logistic回归分析显示，hs-CRP、SAA、RBP4高表达为GDM患者发生MS的危险因素。ROC曲线分析显示，hs-CRP、SAA、RBP4预测MS发生的AUC分别为0.797、0.716、0.846(P <0.05)，敏感度分别为51.20%、53.70%、70.70%；特异性分别为100.00%、100.00%、90.2D-Lin-MC3-DMA体内0%。结论 外周血hs-CRP、SAA、RBP4在GDM患者中呈高表达，其水平的升高可能与产后MS的发生具有关联，可通过检测其含量为预测MS发生提供重要参考。

嫩度是消费者最重视的肉类食用品质之一,改善宰后嫩度最常用方式是4℃自然冷却成熟。由于动物宰后短时间内会流失大量血液,停止氧气摄入,随后动物肌细胞会进入不可逆的缺氧、缺血、缺乏能量的状态,机体为维持自身稳态发生“细胞凋亡”和“细胞自噬”。其中,细胞凋亡酶caspase-3促进肉嫩化的机制已被证实。此外,细胞自噬参与肌肉宰后成熟早期阶段,并与细胞凋亡协同作用促进肉嫩化。槲皮素对4℃贮藏期间羊肉、鸡肉品质和抗氧化作用具有积极的影响。但槲皮素对鸡肉宰后成熟阶段嫩度的作用机理尚不清楚。因此,为探究槲皮素对肉嫩度改善的作用机制,本研究以宰后成熟的鸡胸肉为研究对象,研究了槲皮素处理对宰后不同成熟时间(0 d、1 d、3 d和5 d)鸡肉的嫩度、氧化情况、肌原纤维结构、细胞凋亡酶caspase-3活性、钙蛋白酶μ-calpain表达以及线粒体通路和内质网通路相关调控因子、细胞自噬相关因子和PI3K/Akt/m TOR信号通路因子表达的影响,最后通过注射和浸渍两种处理,研究槲皮素对鸡肉宰后成熟阶段宏观品质的影响。确定槲皮素对鸡肉嫩度的改善作用及机制,进一步从自噬角度完善肉类宰后成熟机制,为肉类嫩度品质的调控提供理论指导。本研究的主要内容及结果如下:(1)探究槲皮素处理对宰后鸡肉嫩度、肌原纤维结构及氧化情况的影响:100μg/m L槲皮素处理宰后鸡胸肉,生理盐水处理作为对照。结果显示,functional medicine槲皮素可极显著降低宰后成熟期间鸡肉的剪切力(p<0.01),宰后1 d、3 d和5 Baf-A1作用d分别降低了45.20%,40.17%和18.72%;提高MFI值,宰后1 d和5 d分别提高了20.23%和13.33%;H&E染色和透射电镜结果表明槲皮素可促进肌原纤维裂解,免疫印迹分析结果发现槲皮素可促进troponin-T的降解,以及μ-calpain和caspase-3的激活,此外,槲皮素可降低肌肉宰后成熟期间ROS和MDA含量,提高SOD活性,说明槲皮素可减弱宰后储存引起的氧化应激,恢复肌肉组织中的氧化还原平衡,促进肌原纤维裂解,改善鸡胸肉嫩度。(2)探究槲皮素处理对细胞凋亡、细胞自噬相关信号因子的影响:利用100μg/m L槲皮素处理宰后成熟期间不同时间点(0 d、1 d、3 d和5 d)鸡胸肉,借助免疫印迹分析检测发现槲皮素可显著提高宰后成熟期间鸡胸肉线粒体通路中Bax/Bcl-2比例,cleaved-caspase-9和cleaved-caspase-3的表达(p<0.05),提高内质网通路中Bi P和XBP1表达,促进IRE1磷酸化,降低pro-caspase-12表达。表明槲皮素可以通过激活细胞凋亡通路中线粒体通路和内质网通路,抑制PI3K/Akt/m TOR通路,促进细胞凋亡和自噬的发生。此外,cleaved-caspase-3免疫组化图像和LC3II免疫荧光结果进一步证明了这一论断。(3)探究槲皮素处理对宰后成熟期间鸡胸肉宏观品质的影响:分别采用槲皮素(100μg/m L)注射和浸渍的方式处理宰后成熟不同时间点(0 d、1 d、3 d和5 d)的鸡胸肉组织,结果表示,槲皮素可提高鸡胸肉的亮度(L*值)和红度(a*值),降低黄度(b*值),延缓成熟期间产生的脂肪氧化,降低蒸煮损BI 10773细胞培养失和剪切力,但对p H值和滴水损失无显著影响,通过对炸制的鸡胸肉进行感官评价,发现槲皮素注射和浸渍可改善鸡胸肉色泽,减少腥味,提高嫩度,改善鸡胸肉的感官品质。

目的：探讨养子时刻注穴法针刺结合常规降压药物治疗高血压病Ceralasertib NMR的疗效。方法：按照简单随机法选取我院2019年8月—2021年8月收治的90例高血压患者，对照组45例给予常规硝苯地平降压治疗，观察组45例在对照组的基础上给予养子时刻注穴法针刺治疗。对比两组临床疗效，治疗前后的平均动脉压、血压以及血管内皮因子水平。结果：对照组的临床有效率为84.44%(38/45)，观察组的临床有效率为97.78%(44/45)，观察组明显高于对照组（P<0.05）。治疗前，两组IL-1β、ET-1、NO水平差异无统计学意义（P>0.05）；而治疗后与治疗前相比，两组NO水平水平均升高，peer-mediated instruction且观察组与对照组相比明显更高，IL-1β、ET-1水平降低，且观察组与对照Gefitinib抑制剂组相比明显更低（P<0.05）。治疗前，两组平均动脉压、血压水平差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后与治疗前相比，两组平均动脉压、血压水平均降低，且观察组与对照组相比明显更低（P<0.05）。结论：养子时刻注穴法针刺结合常规降压药物可有效改善高血压患者血管内皮因子水平，降低其平均动脉压、血压水平，进而提高整体临床疗效。

目的 探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇及2型糖尿病(T2DM)患者肠道菌群的特点。方法 选取61例女性作为研究对象，将GDM孕妇纳入G组(n=15),健康孕妇纳入N组(n=18), T2DM患者纳入D组(n=14),健康女性纳入A组(n=14)。收集4组粪便样本，采用16S rDNA高通量基因测序技术进行测序，并对样品物种多样性分析、组间物种差异进行分析。结果 肠道菌群多样性分析显示，GDM孕妇与健康孕妇、T2DM患者与健康女性的Beta多样性比较，差异有统计学意义(P<0.05);在Alpha多样性上，T2DM患者的菌群丰富度与健康此网站女性比较，差异有统计学意义(P<0.05)。GDM孕妇与健康孕妇相比，肠道菌群中厚壁菌门(Firmicutes)丰度升高，拟杆菌门(Bacteroidetes)、毛螺菌属(Lachnobacterium)丰度降bio-inspired sensor低，差异有统计学意义(P<0.05)。T2DM患者与健康女性相比，肠道菌群中考拉杆菌属(Phascolarctobacterium)的丰度升高，变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、罗selleck Barasertib氏菌属(Roseburia)、苏黎世杆菌属(Turicibacter)、链球菌属(Streptococcus)、放线菌属(Actinomyces)、粪球菌属(Coprococcus)、变形杆菌属(Proteus)等人体共生菌丰度降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 与健康女性相比，GDM孕妇和T2DM患者的肠道菌群均存在显著差异，该研究结果可为未来临床应用肠道微生态制剂治疗GDM和T2DM提供参考依据。