RAF信号通路

目的：探讨血液常规参数与认知功能减退的关系。方法：本回顾性病例对照研究中，2017年～2018年从深圳市罗湖区51selleck KD025个社区卫生中心纳入8025名60岁以上老人。根据简易精神状态检查（MMSE）评分和教育程度，被分为认知功能筛查阳性组（n=385）和认知功能筛查阴性组（n=7640）。对收集到的血常规检测数据（包括白细胞、淋巴细胞计数、中性粒细胞计数、单粒细胞计数、单核细胞计数、淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞、红细胞计数、红细胞、血红蛋白、平均红细胞体积、平均红细胞、平均红细胞血红蛋白浓度、血细胞压积、血小板计数、MPV、PDW和RDW，包括红细胞分布宽度标准差和红细胞分布宽度系数变量）采用非参数检验、卡方检验和二元逻辑回归法进行分析。结果：与认知功能筛查阴性组相比，认知功能筛查阳性组的淋巴细胞-单核细胞比率（LMR）、红细胞压积（PCV）和血小板计数（PLT）显著降低（7.26[5.50,8.81]vs.40.5[37.7,43.1];216[190,258]vs.228[196,261],P<0.05），而单核细胞计数和平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）较高（0.31 [0.25,0.38] vs. 0.3 [0.24,0.37];336[330,343]vs.335[328,342],P<0.05）。此外，MCHC[比值比（OR）:1.011,95%CI:1.001–1.021,P=0.033]和PCV[OR:0.993,95%CI:0.987plant molecular biology–0.999,P=0.033GDC-0068]与认知功能减退独立相关。结论：一些常规血液检查参数的改变，包括LMR、PCV和PLT降低，单核细胞计数和MCHC升高，可能与认知功能减退有关。

目的:2021年第五版WHO CNS肿瘤分类(以下简称新版肿瘤分类)将编码周期依赖性激酶抑制剂2 A/B(CDKN2A/B)HD纳入胶质瘤的分级诊断依据。CDKN2A HD状态通常使用荧光原位杂交(FISH)、阵列比较基因组杂交或多重连接依赖探针扩增(MLPA)或二代测序进行评估。然而,这些检测方法成本高、操作周期长、实验条件要求高,并不适用于临床普遍开展。因此,寻找一种便捷有效的CDKN2A缺失检测替代方法是急需解决的临床问题。免疫组化染色(IHC)是临床病理科广泛开展的蛋白检测方法,应用IHC检测蛋白来反映CDKN2A/B缺失状态是最直接简便的方法。甲基硫代腺苷磷酸化酶(MTAP)基因位于CDKN2A附近,常与CDKN2A共缺失。MTAP蛋白是许多肿瘤中CDKN2A HD的一种预测的标记物,但尚未在胶质瘤中进行充分检测和验证。本研究选取14例高级别星形细胞瘤和23例PXA作为胶质瘤的代表,目的是在新版肿瘤分类框架下探讨在胶质瘤中是否可以用MTAP免疫组化初步预测CDKN2A的纯合缺失。方法:1.收集患者临床信息,总结病理形态学特征、分子表型及遗传学信息。2.FISH方法检测CDKN2A纯合性缺失情况。3.IHC方法检测MTAP蛋白表达情况。4.统计分析两种检测方法的一致性。结果:1.临床资料和特征本研究选取的14例高级别星形细胞瘤患者中,WHO分级均为4级,男、女各7例。确诊时患者的年龄23-67岁。肿瘤大小范围0.5-8.0cm。肿瘤主要位于额叶。平均随访时间为20个月,所有患者均行全切手术。本研究选取的23例PXA患者中,有WHO 2级10例、WHO 3级13例,男性12例、女性11例。确诊时患者的7～69岁。肿瘤大小范围1.5-8cm。肿瘤主要位于颞叶。平均随访时间为22.3个月,所有患者均行全切手术。2.CDKN2A FISH结果57.1%(8/14)的星形细胞瘤患者中存在CDKN2A HD。CDKN2A纯合缺失组Ki-67平均指数是39%±24,统计分析表明CDKN2A HD组的K i-67指数明显高于非CDKN2A HD组(P<0.05)。65.2%(15/23)的PXA患者中存在CDKN2A HD。在50.0%(5/10)的WHO 2级和76.9%(10/13)的WHO 3级PXA患者中存在这种情况。WHO分级更高的PXA患者CDKN2Abiopolymer extraction HD频率更高(p<0.05)。CDKN2A纯合缺失组Ki-67平均指数是13%±9,统计分析表明CDKN2A HD组Ki-67指数明显高于非CDKN2A HD组(P<0.05)。3.MTAP免疫组化结果50%(7/14)的星形细胞瘤中观察到MTAP免疫组化阴性表达。在C DKN2A HD病例中,87.5%(7/8)显示MTAP IHC阴性表达;统计分析显示MTAP免疫组化检测的灵敏度=87.5%,特异度=100%,阳性预测值P PV=100%,阴性预测值NPV=85.7%。高级别胶质瘤中MTAP蛋白阴性表达组Ki-67平均指数是33%±13,MTAP蛋白阴性表达组Ki-67指数明显高于MTAP蛋白阳性表达组(P<0.05)。56.5%(13/23)的PXA中观察到MTAP免疫组化阴性表达。在40.0%(4/10)的WHO 2级和69.2%(9/13)的WHO 3级PXA患寻找更多者中存在这种情况。WHO分级更高的PXA患者MTAP蛋白阴性表达频率更高(p<0.05)。在CDKN2A HD PXA中,86.7%(13/15)显示MTAP IHC阴性表达;统计分析显示MTAP免疫组化检测的灵敏度=86.7%,特异度=100%,阳性预测值PPV=100%,阴性预测值NPV=82.4%。PXA中MTAP蛋白阴性表达组Ki-67平均指数是13%±9,统计分析表明MTAP蛋白阴性表达组的Ki-67指数明显高于MTAP蛋白阳性表达组(P<0.05)。4.生存分析生存曲线表明,CDKN2A HD及GSK126细胞培养MTAP表达丢失与高级别星形细胞瘤及PXA患者的总体生存率关系无统计学意义(P>0.05)。结论:1.高级别星形细胞瘤和PXA中CDKN2A HD与MTAP蛋白表达丢失的比例均较高,而且两者有较高的一致性。2.在临床中可用MTAP免疫组化方法作为CDKN2A HD的初筛手段。3.CDKN2A HD和MTAP蛋白阴性表达的胶质瘤,Ki-67指数明显升高,提示与肿瘤增殖活性密切相关。4.WHO分级更高的PXA患者CDKN2A HD和MTAP蛋白阴性表达频率更高,可能是PXA WHO分级的重要分子指标。

目的:观察miR-451-3p与自噬水平在假手术组和心肌缺血再灌注损伤大鼠(I/R)中的表达差异,建立miR-451-3p过表达的大鼠I/R模型和自噬抑制的大鼠I/R模型,论证miR-451-3p对自噬和MIRI的影响,阐明miR-451-3p调控自噬水平参与MIRI的机制,为心肌缺血再灌注损伤的临床治疗提供新思路。方法:把40只SD大鼠随机平均分为5组,分别是假手术(Sham)组、心肌缺血再灌注损伤(I/R)组、I/R+自噬抑制剂(3-MA)组、I/R+腺病毒空白转染(mimics-NC)组、I/R+miR-451-3p过表达(miR-451-3p mimics)组,每组8只。MIRI模型建立方法是:结扎冠状动脉的左前降支,结扎30min后解开结扎线,恢复血流灌注24h。用双荧光素酶报告基因检测miR-451-3p与MAP1LC3B的关系,TTC染色检测缺血心肌的面积;RT-q PCR检测miR-451-3p和MAP1LC3B的水平;再灌注结束后在腹主动脉取动脉血,用ELISA检测CK-MB和c Tn I的水平;Tunel染色检测心肌细胞凋亡情况;用Western Blot检测ATG3、ATG5、ATG7、p62、Beclin-1、LC3-II/LC3-I的表达情况。结果:双荧光素酶实验提示miR-451-3p抑制MAP1LC3B的转录。TTC染色结果显示,与Sham组相比,I/R组心肌缺血面积增大(***P<0.001);与I/R组相比,I/R+3-MA组心肌缺血面积减少(**P<0.01);与Sham组相比,I/R+mimics NC组心肌缺血面积增大(***P<0.001);与I/R+mimics NC组相比,I/R+miR-451-3p mimics组心肌缺血面积减少(**P<0.01)。ELISA、Tunel染色检测心肌损伤结果与TTC一致,与Sham组相比,I/R组损伤加重;与I/R组相比,3-MA组损伤减轻;与Sham组相比,I/R+mimics NC组损伤加重;与I/R+mimics NC组相比,I/R+miR-451-3p mimics组损伤减轻(*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001)。RT-q PCR结果显示,与Sham组相比,I/R组miR-451-3p表达降低、MAP1LC3B表达升高;与I/R组相比,3-MA组miR-451-3p表达升高、MAP1LC3B表达降低;与Sham组相比,I/R+mimics NC组miR-451-3p表达降低、MAP1LC3B表达升高;与I/R+mimics NC组相比,I/R+miR-451-3p mimics组miR-451-3p表达升高、MAP1LC3B表达降低,(*P<0.05,**P<0.01,Q-VD-Oph体内实验剂量***P<0.001)。Western Blot结果显示,与Sham组相比,I/R组自LY2157299配制噬水平升高;与I/R组相比,3-MA组自噬被抑制;与Sham组相比,I/R+mimics NC组自噬水平升高;与I/R+mimics NC组相比,I/R+miR-451-3p mimics组自噬被抑制,差异均有统计学意义(P*<0.05,P**<0.01,P***<0.001)。结论:I/R发生时,过表达miR-451-3p对受损心肌存在保护作用;抑制自噬水平可以减轻I/R导致的心肌损伤;miR-451-3p与自噬相关基因MAP1LC3B具有靶向调控关系,miR-451-3p通过抑Transgenerational immune priming制MAP1LC3B减轻I/R导致的心肌损害。

目的探讨miR-133a在矽肺大鼠纤维化中的干预作用。方法利用targetscan查询micro133a的获得调节的基因,进行双荧光素酶报告系统验证。将48只健康雄性SD大鼠随机分为4组:空白对照组,矽肺模型组组,agomirNC无关序列对照组,agomiR-133a干预组,每组各12只。对照组大鼠通过气管滴注1 mL生理盐水。其余各组通过气管滴注1 mL SiO_2混悬液(100 mg/mL)。miR-133a干预组大鼠在造模后第29、32、35、38、41、44、47天经尾静脉注射3 nmol agomir-133a。无关序列对照组大鼠在相同时间经尾静脉注射agomirNC 30 nmol。造模后75天统一麻醉处死大鼠,大鼠肺组织用HE染色R428观察病理结构和Masson染色观察纤维化程度,,计算各组大鼠肺脏器系数,检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量。western检测各组大鼠FGFR1,E-cadherin表达水平。结果生物信息学筛选发现micro133a能够调节成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receport,FGFR1),利用双荧光素酶系统确认了miR-133a对FGFR1的调节作用。肺组织病理学结果显示,对照组大鼠肺泡壁和肺泡间隔完整,无炎性细胞,无纤维化增生;模型组和agomirNC组大鼠肺泡结构破坏,肺泡壁增厚,大量炎性细胞浸润,大量胶原纤维增生和细胞性结。agomiR-133a干预组大鼠肺泡和肺泡壁结构明显改善,轻度纤维化,少量胶原纤维,细胞性结节数量明显减少。与空白对照组相比,模型组、agomirNC组和agomir-133a干预组大鼠肺脏器系数、肺组织中HYP含量增加,与模型组及agprotozoan infectionsomirNC组比较,agoPexidartinib IC50mir-133a干预组大鼠肺脏器系数、肺组织中HYP含量均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)miR-133a能降低矽肺大鼠肺组织中FGFR1表达,增加E-cadherin表达,减轻矽肺大鼠的EMT过程。结论:通过尾静脉注射agomiR-133a的方法,可以减轻矽肺大鼠的纤维化。

目的 探讨低分子肝素联合踝泵运动对脊柱术后脑脊液漏患者下肢深静脉血栓的预防作用。方法 收集2019年2月至2022年4月首都医科大学附属北京积水潭医院收治的126例脊柱术后脑脊液漏患者的临床资料，根据术后干预方式的不同将患者分为对照组（n=69，给予常规术后处理）和联合组（n=57，在常规术后处理的基础上给予Tezacaftor低分子肝素联合踝泵运动）。比较两组患者的手术相关指标，以及住院期间下肢深静脉血栓的发生情况、出院前D-二聚体水平升高情况、凝血功能。结果 两组患者脊柱疾病类型、手术部位、全身麻醉的使用率及手术时间比较，差异均无统计学意义（P﹥0.05）。住院期间，联合组患者D-二聚体水平升高的比例、下肢深静脉血栓的发生率均低于对照组患者，差异均有统计学意义（P﹤0.05）。两组患者的凝血酶原时间和国际标准化比值比较，差异均无统计学意义（P﹥0.05）。两组患者住院期间均未发生出血、感染等并Response biomarkers发症。结论 低分子肝素联合踝泵运动对脊柱术后脑脊液漏患者下肢深静脉血栓具有selleck Alisertib较好的预防作用，值得临床推广。

目的 评价聚乙二醇干扰素-α2b对慢性骨髓增殖性肿瘤患者的临床疗效及不良反应。方法 回顾性分析107例慢性骨髓增殖性肿瘤病例，其中包括95例原发性血小板增多症（ET）,12例真性红细胞增多症（PV），接受聚乙二醇干扰素-α2b治疗12月以上，分析其临床数据，评价疗效和不良反应。结果 接受聚乙二醇干扰素-α2b治疗后，ET及PV患者均获得较高的血液学缓解率（P<0.05）,ET与PV治疗组间缓解率差异无统计学意义（0.86 vs 0.78,P>0.05），脾脏长厚径（脾脏指数）下降13.5%(95%CI:8.5%～18.5%)，获得血液学缓解的患者MPN10评分下降较为显著（P<0.01）。PV患者JAK2V617F等位基因突变购买D-Lin-MC3-DMA负荷中位值由67.23%(49.6%～84.86%)下降至19.7%(0.57%～74.6%)(P<0.05);ET患者JAK2V617F突变定量阳由48.97%(0.45%～74.24%)下降至22.1%(0.33%～65.42%)(P<0.05)。ET和PV患者观察到轻微不良反应（1-2级），差异无统计学意义。治疗期间血栓事MS-275细胞培养件发生率为2.8%。未观察到严重不良反应。结论 聚乙二醇干扰素-α2b治疗PV和ET获得较高的外周血细胞缓解率，具有缩脾疗效，并降低JAK2V617F基因突变art of medicine负荷，不良反应轻微，多数患者可耐受。

背景：研究表明，糖皮质激素诱发股骨头坏死过程中骨代谢失衡与氧化应激密切相关。目的：探究氧化应激诱导成骨细胞铁死亡、促进成骨细胞凋亡、参与激素性股骨头坏死的病理机制。方法：收集47例激素性股骨头坏死患者的一般资料、血清标本和6例股骨头标本，根据ARCO分期selleck激酶抑制剂标准将血清标本分为ARCOⅡ期、Ⅲ期及Ⅳ期，股骨头标本分为ARCOⅢ期及Ⅳ期。检测血清中丙二醛、超氧化物歧化酶1水平；通过DIA蛋白定量测序、免疫蛋白印迹试验及碱性磷酸检测并验证患者股骨头中超氧化物歧化酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4、Bcl-2蛋白的表达。结果与结论：(1)激素性股骨头坏死患者的ARCO分期与年龄、性别、侧别无关；(2)ARCOⅢ期患者血清中丙二醛、超氧化物歧化酶1水平较Ⅱ期、Ⅳ期高；(3)在坏死区域与正常区域对比中，DIA蛋白定量测序结果显示，差异蛋白的功能主要与氧化还原相关，其中坏死区域中超氧化物歧化酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4、Bcl-2蛋白表达较正常区域低，且ARCOⅣ期低Medical kits于Ⅲ期；Western blot验证了DIA蛋白定量结果，且坏死区域中碱性磷酸酶活性低于正常区域，Ⅳ期低于Ⅲ期；(4)在坏死区域与硬化带区域中，差异蛋白的功能同样与氧化还原相关，且坏死区域中超氧化物歧化酶1、此网站谷胱甘肽过氧化物酶4、Bcl-2蛋白表达及碱性磷酸酶活性较硬化带区域低，且Ⅳ期低于Ⅲ期；(5)结果说明，糖皮质激素可通过上调氧化应激水平，诱导成骨细胞铁死亡的发生，抑制成骨功能，影响激素性股骨头坏死的进展。

目的:肺癌是全球癌症发病和死亡的主要原因,造成巨大的公共卫生负担。有效的早期诊断是减少肺癌相关死亡和改善患者预后的重要防控目标。以铂类为基础的化疗目前仍旧是肺癌的一线疗法,但频繁的耐药和复发等不良临床事件的发生为肺癌的预后带来巨大挑战。因此,深入研究肺癌的发生发展机制以鉴定其中的关键分子事件,积极探寻有助于早期诊断和预后的生物标志物以及潜在的干预靶点,对于实现肺癌的三级预防具有十分重要的公共卫生意义。吸烟是肺癌最主要的危险因素,烟草烟雾中以苯并(a)芘为代表的多环芳烃类致癌物与肺癌的发生发展密切相关。肺癌通常是环境和遗传因素交互作用下驱动的产物。全基因组关联性研究和流行病学证据表明人类19号染色体长臂1区3带(19q13)遗传或表观遗传变异与肺癌的发病风险及预后结局密切相关。FBJ鼠骨肉瘤病毒癌基因的同源物B(FBJ Murine Osteosarcoma Viral Oncogene Homolog B,FOSB)是位列19q13的基因之一,其编码的蛋白作为核转录因子发挥生物学功能。近年来有关FOSB在肺癌发生发展及预后中的作用存在争议,具体机制也尚未完全阐明。我们在前期研究中发现,转录因子FOSB在多环芳烃诱导肺上皮细胞恶性转化和吸烟相关肺癌组织中的表达显著下调,提示其可能作为潜在的肿瘤抑制因子参与烟草烟雾暴露诱导的肺部癌变。有趣的是,生存分析表明FOSB在TP53基因不同突变状态的肺癌组织中的表达指示截然相反的预后,提示TP53基因突变状态可能作为一种关键的分子开关导致FOSB在肺癌细胞中的肿瘤生物学效应发生转变。因此,本研究提出应以TP53基因突变状态为特定遗传背景,系统探讨转录因子FOSB在多环芳烃所致肺癌变中的表达特征及其在肺癌恶性进展和基于铂类治疗的预后中的具体作用及潜在分子机制,Strongyloides hyperinfection为鉴定吸烟相关肺癌易感、诊断和预后更加确切的生物标志物以及潜在的治疗靶点提供新的科学线索和独特的机制见解。研究方法:1.使用课题组建立的BPDE诱导的人肺支气管上皮细胞16HBE恶性转化模型,RT-q PCR和Western Blot分别检测恶性转化过程中FOSB m RNA和蛋白表达水平的变化。2.RT-q PCR和Western Blot分别检测人正常肺上皮细胞系和NSCLC细胞系中FOSB m RNA和蛋白的差异表达。3.利用TCGA数据库NSCLC队列分析FOSB m RNA在吸烟相关NSCLC组织和癌旁组织中的差异表达及其表达与NSCLC患者临床病理特征和预后之间的关联性。4.RT-q PCR和Western Blot分别检测吸烟相关肺癌组织和配对的癌旁组织中FOSB m RNA和蛋白的差异表达。5.采用分子克隆技术构建p53-WT、p53-R175H、p53-R248W、p53-R248L、p53-R248Q、p53-R273H和p53-R273L过表达质粒(和元生物,中国),琼脂糖凝胶电泳及Sanger测序(生工公司,中国)对产物的突变位点进行验证。6.野生型p53和不同位点突变型p53质粒转染p53表达缺失的H1299肺癌细胞,RT-q PCR和Western Blot分别检测p53及其下游靶标P21、PUMA m RNA和蛋白表达水平。7.在表达野生型p53和不同位点突变型p53的H1299细胞中转染FOSB过表达质粒(和元生物,中国),RT-q PCR和Western Blot分别检测FOSB m RNA和蛋白表达水平。8.CCK-8法检测FOSB过表达对不同TP53突变类型的H1299细胞增殖能力的影响。9.克隆形成实验检测FOSB过表达对不同TP53突变类型的H1299细胞独立生存能力的影响。10.划痕实验和Transwell迁移实验检测FOSB过表达对不同TP53突变类型的H1299细胞迁移能力的影响。11.Matrigel基质胶包被的Transwell侵袭实验检测FOSB过表达对不同TP53突变类型的H1299细胞侵袭能力的影响。12.CCK-8法检测FOSB过表达对不同TP53突变类型的H1299细胞顺铂敏感性的影响。13.流式细胞术检测FOSB过表达对顺铂诱导的不同TP53突变类型的H1299细胞凋亡的影响。14.构建FOSB过表达的H1299(p53-Null)、H1299(p53-WT)和H1299(p53-R248Q)转染细胞后进行转录组测序(联川生物,中国),火山图可视化差异表达基因(DEGs)。15.对上述三种FOSB过表达转染细胞中上调的DEGs集进行生物学富集分析(GO分析),气泡图可视化富集分析的结果。16.RT-q PCR和Western Blot分别检测FOSB过表达对H1299(p53-Null)、H1299(p53-WT)、A549(p53-WT)、H1299(p53-R248Q)和PC-9(p53-R248Q)肺癌细胞中候选的FOSB转录调控靶标及其下游信号通路的影响。17.使用si RNA介导的RNA干扰技术沉默候选的FOSB转录调控靶标后测定肿瘤生物学表型的变化:CCK-8法检测细胞的增殖能力;克隆形成实验检测细胞的独立生存能力;划痕实验及Transwell迁移实验检测细胞的迁移能力;Matrigel基质胶包被的Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力;CCK-8法检测细胞的顺铂敏感性。18.使用si RNA介导的RNA干扰技术沉默A549细胞中内源性野生型p53,RT-q PCR和Western Blot分别检测FOSB过表达对下游相关指标m RNA和蛋白水平的影响。19.使用si RNA介导的RNA干扰技术沉默PC-9细胞中内源性突变型p53-R248Q,RT-q PCR和Western Blot分别检测FOSB过表达对下游相关指标m RNA和蛋白水平的影响。20.使用Gene MANIA数据库构建以FOSB和p53为中心枢纽的蛋白-蛋白互作网络。21.Co-IP实验检测H1299(p53-WT)、A549(p53-WT)、H1299(p53-R248Q)和PC-9(p53-R248Q)肺癌细胞中FOSB与内源或外源性野生型p53或突变型p53-R248Q之间的蛋白-蛋白相互作用。22.JASPAR数据库预测PREX1、IGFBP5、AKR1C3和ALDH3A1基因启动子中转录因子FOSB潜在的结合位点。23.Ch IP-q PCR实验验证转录因子FOSB与候选靶基因PREX1、IGFBP5、AKR1C3和ALDH3A1启动子序列的直接结合以及p53状态的切换对FOSB与上述靶基因启动子结合能力的影响。结果:1.转录因子FOSB在BPDE诱导肺上皮细胞恶性转化和吸烟相关肺癌组织中表达的分子特征:(1)FOSB m RNA和蛋白表达水平在BPDE诱导肺上皮细胞恶性转化、非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系和吸烟相关NSCLC组织中均显著下调(P<0.05)。(2)FOSB在肺腺癌(LUAD)和肺鳞癌(LUSC)中的表达指示截然相反的预后:FOSB高表达在吸烟相关LUAD中指示更长的总生存期(OS)且与积极的临床病理特征相关联(P<0.05),而在吸烟相关LUSC中则完全相反(P<0.05)。(3)NSCLC中TP53基因的突变率存在显著差异:其在LUAD中约为50%,在LUSC中则超过85%。(4)FOSB在NSCLC中表达的预后效应依赖于TP53基因的突变状态:在野生型TP53遗传背景下,FOSB高表达指示更长的OS且与积极的临床病理特征和预后指数相关联(P<0.05);在突变型TP53遗传背景下,FOSB高表达指示更短的OS且与不良的临床病理特征和预后指数相关联(P<0.05)。2.转录因子FOSB对携带不同TP53突变类型H1299肺癌细胞恶性生物学行为及顺铂敏感性的影响:(1)在p53缺失(p53-Null)的H1299细胞中,FOSB过表达促进细胞增殖(P<0.05)和克隆形成能力(P<0.05);在表达野生型p53(p53-WT)的H1299细胞中,FOSB过表达抑制细胞增殖(P<0.05)和克隆形成能力(P<0.05);在表达突变型p53-R175H、p53-R248Q及p53-R273L的H1299细胞中,FOSB过表达促进细胞增殖(P<0.05)和克隆形成能力(P<0.05)。(2)在p53缺失(p53-Null)的H1299细胞中,FOSB过表达促进细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05);在表达野生型p53(p53-WT)的H1299细胞中,FOSB过表达抑制细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05);在表达突变型p53-R175H、p53-R248Q和p53-R273L的H1299细胞中,FOSB过表达促进细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05)。(3)在表达野生型p53(p53-WT)的H1299细胞中,FOSB过表达提高肿瘤细胞的顺铂敏感性(P<0.05);在表达突变型p53-R248Q的H1299细胞中,FOSB过表达降低肿瘤细胞的顺铂敏感性(P<0.05)。(4)在表达野生型p53(p53-WT)的H1299细胞中,FOSB过表达促进顺铂诱导的细胞凋亡(P<0.05);在表达突变型p53-R248Q的H1299细胞中,FOSB过表达抑制顺铂诱导的细胞凋亡(P<0.05)。3.转录因子FOSB以p53依赖性方式调节肺癌细胞恶性生物学行为及顺铂敏感性的分子机制:(1)FOSB过表达在H1299(p53-Null)、H1299(p53-WT)和H1299(p53-R248Q)三种肺癌细胞中引起独特的转录组学变化。(2)生物学富集分析结合RT-q PCR实验验证筛选出PREX1是FOSB在p53缺失的肺癌细胞中特异的转录调控靶标(P<0.05);IGFBP5是FOSB在表达p53-MS-275化学结构WT的肺癌细胞中特异的转录调控靶标(P<0.05);AKR1C3和ALDH3A1是FOSB在表达p53-R248Q的肺癌细胞中特异的转录调控靶标(P<0.05)。(3)在p53-Null的肺癌细胞中,FOSB过表达特异性上调PREX1并激活其下游RAC1-ERK/AKT致癌信号通路(P<0.05),沉默PREX1阻断FOSB过表达对下游RAC1/ERK/AKT致癌信号通路激活(P<0.05);在表达p53-WT的肺癌细胞中,FOSB过表达特异性上调IGFBP5并激活其下游p53信号通路和抑制ERK/AKT致癌信号通路(P<0.05),沉默IGFBP5阻断FOSB过表达对下游p53信号通路的激活及ERK/AKT致癌信号通路的抑制(P<0.05);在表达p53-R248Q的肺癌细胞中,FOSB过表达特异性上调AKR1C3和ALDH3A1并激活其下游ERK/AKT致癌信号通路(P<0.05),沉默AKR1C3阻断FOSB过表达对下游ERK/AKT致癌信号通路的激活(P<0.05)。(4)FOSB过表达显著促进H1299(p53-Null)肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭性(P<0.05),沉默PREX1阻断FOSB过表达对肺癌细胞恶性生物学行为的促进作用(P<0.05);FOSB过表达显著抑制H1299(p53-WT)和A549(p53-WT)肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭性并提高其顺铂敏感性(P<0.05),沉默IGFBP5阻断FOSB过表达对肺癌细胞恶性生物学行为的抑制及顺铂敏感性促进作用(P<0.05);FOSB过表达显著促进H1299(p53-R248Q)和PC-9(p53-R248Q)肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭性并降Nirmatrelvir半抑制浓度低其顺铂敏感性(P<0.05),沉默AKR1C3阻断FOSB过表达对肺癌细胞恶性生物学行为的促进及顺铂敏感性的抑制作用(P<0.05)。(5)沉默A549细胞中的内源性p53-WT导致FOSB的转录靶标由IGFBP5向PREX1转变(P<0.05);沉默PC-9细胞中的内源性p53-R248Q导致FOSB的转录靶标由AKR1C3和ALDH3A1向PREX1转变(P<0.05)。(6)Co-IP实验显示使用FOSB特异性抗体或p53特异性抗体进行免疫共沉淀均能检测到FOSB与内源或外源性p53-WT和p53-R248Q之间的蛋白-蛋白互作。(7)在H1299(p53-Null)肺癌细胞中,只检测到FOSB与PREX1启动子的直接结合(P<0.05);在H1299(p53-WT)肺癌细胞中,p53-WT过表达导致FOSB与PREX1启动子结合能力的减弱(P<0.05)并促进其与IGFBP5启动子的结合(P<0.05);在H1299(p53-R248Q)肺癌细胞中,p53-R248Q过表达导致FOSB与PREX1启动子结合能力的减弱(P<0.05)并促进其与AKR1C3(P<0.05)和ALDH3A1(P<0.05)启动子的结合。结论:转录因子FOSB在多环芳烃诱导肺上皮细胞恶性转化和吸烟相关肺癌组织中表达下调,其高表达指示野生型TP53肺癌患者预后良好,突变型TP53肺癌患者预后不良。在TP53缺失遗传背景下,转录因子FOSB通过PREX1调节下游RAC1-ERK/AKT致癌信号通路促进肺癌细胞的恶性生物学行为;在野生型TP53遗传背景下,其通过IGFBP5调节下游p53信号通路和ERK/AKT致癌信号通路抑制肺癌细胞的恶性生物学行为并提高其顺铂敏感性;在突变型TP53-R248Q遗传背景下,其通过AKR1C3/ALDH3A1调节下游ERK/AKT致癌信号通路促进肺癌细胞恶性生物学行为并降低其顺铂敏感性。野生或突变型p53通过与FOSB建立直接的蛋白-蛋白互作,引导FOSB识别并结合不同的启动子序列以转录激活特定靶基因的表达,从而对肺癌的进展及预后产生不同的影响。

失眠极为常见，除造成患者生活质量下降和医疗费用负担外，也是Alisertib多种身心疾病的危险因素。尽管认知行为疗法是治疗失眠的一线治疗方法，但因难以获得、成本高昂等原因应用不广。因此，药物治疗依然是患者和临床医生普遍选择的治疗方式。现有化学药物包括苯二氮■受体激动剂、双食欲素拮抗剂、褪黑素及其受体激动剂、组胺拮抗剂、抗抑郁及抗精神病药等，能够诱导和(或)维持睡眠，对急性失眠有良好的治疗效果，但对慢性失眠的疗效不确切，且存在较多副作用、影响睡眠结构及生理功能等方面的问题。在整体观念、辨证论治的指导确认细节原则下，中医药在临床中显示出很好的疗效，但目前高等级的临床证据较为缺乏。催frozen mitral bioprosthesis眠药物的作用机制、剂量、半衰期、对睡眠结构的调整情况及副作用是临床使用需要考虑的因素，作者从以上方面对治疗失眠的药物进行分析总结，为镇静催眠药物的使用和开发提供参考。

[目的]新疆野苹果(Malus.sieversii(Ldb.)Roem)是天山野果林的优势树种,具有重要的生态与资源价值。通过对在轮台资源圃内保存的野苹果资源开展遗传多样性研究,以期对今后苹果种质资源的引种提供借鉴,为天山以南野苹果种质资源的合理利用及优良品种的选育提供依据。[方法]以57份野苹果种质资源,新疆地方品种‘夏红肉’、‘克孜阿尔玛’,现代栽培品种‘皇家嘎啦’为材料,调查花、叶片和果实的16个性状,系统的进行了性状相关、主成分和聚类分析,探讨3种类型苹果资源果实品质、营养成分含量、色泽指标和抗氧化能力对其进WPB biogenesis行综合评价。[结果](1)对果实营养品质分析发现,在57份野生资源中‘GB-3’资源可溶性固形物的含量最高,达20.14%;‘GB-13’的可滴定酸含量最高为145.61 mg/g;‘HDM-13’的维生素C的含量最高为27.31 mg/100g;‘XY-5’的可溶性糖含量最高,为142.82 mg/kg;‘GB-1’果实果皮的总黄酮含量最高,为2816.29 mg/kg。(2)对野苹果种质资源进行了表型多样性分析。选择叶片、花和果实共16个性状进行测量和比较分析,方差分析结果表明16个表型性状变异系数(CV)为15.63%～60.32%,平均值为31.84%,其中果实品质性状平均变异系数最高,均高于50%。上述研究表明:迁地保存的野苹果资源多数表型性状多样性Dibutyryl-cAMP十分丰富,其中果实方面的性状存在更为丰富的多样性。(3)对野苹果种质资源的16个数值型性状进行相关性分析,结果表明:单果重与果实纵径、横径和果梗粗度相互间具有显著的正相关性;此外,总黄酮含量与单果重呈显著负相关性。(4)采用主成分分析法在累计贡献率达80.785%时,得到7个主成分因子,且根据载荷值较高的性状揭示不同的生物学信息,初步认为叶片性状指标在一定程度上是果实总黄酮含量的限制因素。因此在利用野苹果种质资源果实总黄酮含量时应注意选取第1主成分较低的群体。(5)通过系统聚类分析后,在欧式距离为9.0处将57份资源被分成三大类:第Ⅰ类群共17份,以中间过渡型野苹果为主;第Ⅱ类群共16份,以果实高黄酮类化合物含量为主;第Ⅲ类群共24份,以高质量和耐贮存果实为主。(6)3种类型苹果间抗氧化能力强弱顺序:野生资源>新疆地方品种>现代栽培品种,呈现野生型向栽培型过渡趋势;新疆地方品种苹果作为中间改良型品种,类黄酮含量和果实可溶性固形物均比栽培品种苹果高,新疆野苹果资源在色泽和果实品质性状上明显不如地方品种及现代栽培品种,但类黄酮物质及营养成分远高于二者,具有更强的抗氧化能力。其中‘HDM-2’总黄酮含量及抗氧化能力最强,但其果实性状较差、果个较小、果肉质地硬,更适用于开发利Laduviglusib小鼠用相关保健品。