STING蛋白作为免疫疗法的新兴靶标,其激活后可以引起I型干扰素及其他促炎细胞因子表达,从而在免疫反应中发挥关键作用。环二核苷酸分子作为STING蛋白的天然激动剂在调节病原微生物的致病性和抑制肿瘤细胞方面具有重要的作用。然而,环二核苷酸分子的结构特点导致自身具有负电荷、跨膜效率低且稳定性不足,限制了该激动剂在免疫治疗中的应用。因此,本文基于STING激动剂天然环二核苷酸分子的结构特点,针对自身稳定性不足和跨膜效率低的限制,从结构修饰(氟代)和双佐剂及阳离子脂质载体递送两个方面进行研究,评估了在抗肿瘤疫苗中的免疫活性。第一章:首先围绕STING通路进行简单的概述;之后介绍了STING激动剂的发展:包括核苷酸类激动剂和非核苷酸类激动ABT-263细胞培养剂,其中着重介绍了核苷酸类激动剂及其衍生物的研究现状;最后描述了STING激动剂在疫苗中的应用。第二章:氟修饰的环二核苷酸分子的设计、合成及活性研究。在本章中,基于STING激动剂天然环二核苷酸分子的结构特点,对2′-OH位点进行氟代修饰,通过液相“一锅法”合成了5个相关化合物:3,3-GG~FMP、3,3-AA~FMP、3,3-c GA~FMP、3,3-c G~FAMP、2,3-c GA~FMP,并分别在细胞层面和小鼠层面评估了其刺激效果。在体外测试了各衍生物对RAW264.7(鼠源巨噬细胞)的刺激效果,结果表明,相比于PBS组和天然环二核苷酸分子3,3-c GAMP组,氟代修饰环二核苷酸分子刺激的RAW264.7细胞表面CD86表达水平以及产生的IL-6都有所提升;体内刺激结果同样也表明了氟代修饰策略的可行性。总之,对天然环二核苷酸分子的2′-OH位点进行氟代修饰可以促进巨噬细胞的成熟活化,有效的激活免疫系统。第三章:基于双佐剂及阳离子脂质的递送载体开发。我们采用了双佐剂和阳离子脂质递送STING激动剂策略,首先利用静电相互作用将正电性的Pam_3Cys Ser K_4social impact in social media(Pam_3CSK_4)与负电性的cyclic diguanylate(CDG)相结合,之后用阳离子脂质共包封CDG和Pam_3CSK_4激动Empagliflozin剂,制备了脂质体形式的联合佐剂,以4T1细胞裂解物为抗原,评估了其免疫效果。通过对结果进行分析,表明:(1)联合佐剂脂质体组疫苗lip(CDG+Pam_3CSK_4+4T1)和联合佐剂组疫苗(CDG+Pam_3CSK_4+4T1)诱导了更高滴度的特异性Ig G抗体;(2)联合佐剂脂质体组疫苗lip(CDG+Pam_3CSK_4+4T1)和联合佐剂组疫苗(CDG+Pam_3CSK_4+4T1)诱导了强烈的细胞免疫反应。因此,采用双佐剂及阳离子脂质载体策略可以提升环二核苷酸分子的跨膜效率,该疫苗系统能够引起强烈的免疫应答,在肿瘤治疗方面有巨大的潜力。