肺癌是对人类生命健康威胁最大的恶性肿瘤之一,是癌症病人死亡的主要原因。在癌症的临床治疗过程中,有些肿瘤细胞会降低对药物的敏感性,使得药物的治疗不能产生完整且持续的效果,严重威胁病人的生命健康。尽管随着研究的进展涌现出多种应对方法,但肿瘤细胞的药物敏感性差异难题仍需新的解决手段。RNA甲基化是表观遗传学中关键的一环,其中以m6A修饰最为广泛。由于其较高的可塑性及调控的灵活性,m6A修饰在肺癌的多个细胞生命活动中发挥着重要作用,这包括了细胞生长、转移、代谢、分泌、死亡、以及免疫过程。除此之外,有研究表明m6A修饰参与到细胞应激反应过程中,当细胞受到化疗药物的处理时,会引发应激反应来应对药物对肿瘤细胞的损伤,细胞对外界刺激尤其是化疗药物的反应能力决定了细胞对这种药物的敏感程度。因此,m6A修饰在肿瘤细胞尤其是肺癌细胞的药物敏感性变化过程中发挥什么作用是值得探究的。除此之外,肺癌病人组织中多个m6A相关蛋白可作为评估病人预后状况及生存率的关键指标。这也说明了 m6A修饰与肿瘤细胞生命活动的密切关系,以m6A修饰作为突破口来解决肿瘤细胞severe acute respiratory infection药物敏感性差异难题蕴含极大的潜力。RNA甲基化结合蛋白是联系m6A修饰与细胞生命活动过程的桥梁,YTHDF3是RNA甲基化Nirogacestat试剂结合蛋白家族的一个成员,在m6A功能发挥过程中起着重要作用。但是YTHDF3是否在肺癌细胞药物敏感性差异中发挥作用及作用的相关机制目前还未见报道。我们的研究结果表明,在体外及体内水平,SPC及吡柔比星等损伤因素能够引发YTHDF3的动态变化,即细胞死亡发生之前,YTHDF3表达水平逐渐上升,随着细胞死亡逐渐加重,YTHDF3蛋白水平急剧下降。我们推测,细胞死亡之前YTHDF3的升高是细胞受到药物刺激后引发的应激反应来应对这一刺激所带来的压力,这可能是降低药物敏感性的原因。我们构建了 YTHDF3敲低细胞系来验证我们的推测。实验结果表明,抑制YTHDF3的升高显著增强了 SPC及吡柔比星促进肿瘤细胞凋亡的作用效果,过表达YTHDF3则能够减弱SPC及吡柔比星的作用效果,我们通过回复实验验证了这一结果,并且通过在裸鼠皮下注射YTHDF3敲低的肿瘤细胞,证明了 YTHDF3敲低能够增强吡柔比星的治疗效果。除此之外,我们还对YTHDF3动态变化的机制进行初步研究,YTHDF3蛋白水平的上升是由于其mRNA水平的上升,YTHDF3蛋白水平的下降是由于蛋白酶体降解途径的增强。作为RNA甲基化结合蛋白,YTHDF3功能的发挥需要结合于其靶标mRNA,我们通过参考组学测序及RIP-seq结果锁定了 c-JUN,c-JUN是组成转录调控因子AP-1的亚基之一。研究表明,AP-1在多类肿瘤细胞的耐药性中发挥作用,c-JUN也参与到细胞的应激Gefitinib-based PROTAC 3体内反应的调控当中。通过实验,我们验证了 YTHDF3与靶点c-JUN的直接结合以及在体外及体内水平的调控关系,我们还对YTHDF3与其结合的具体位点进行了预测及验证,发现YTHDF3与c-JUN的结合位点位于501-552aa肽段,过表达该肽段缺失的YTHDF3无法发挥野生型YTHDF3的保护作用。除此之外,我们还发现了 YTHDF3能够影响A549细胞在低血清培养状态下的增殖能力、克隆形成能力,通过体内实验发现YTHDF3对肿瘤内部血管生成的影响。综上,我们研究阐述了药物治疗效果与YTHDF3表达变化的相互影响关系,为从m6A修饰角度解决药物敏感性差异难题提供了新的治疗思路。